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更新时间:2025-12-17
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elisa试剂盒显色液a和b液
ELISA检测试剂盒的显色液A和B液是底物系统,A液通常含过氧化氢,B液含TMB。在HRP酶催化下,TMB被氧化成蓝色,加入终止液后转为黄色,颜色深浅与PC浓度成正比。
显色液A液:主要成分为过氧化氢(H₂O₂),作为氧化剂,为酶促反应提供必需的氧原子。
显色液B液:主要成分为TMB,是一种无色的发色底物,在HRP酶的催化下被氧化生成蓝色产物。
显色原理:HRP酶催化H₂O₂分解,产生的活性氧将TMB氧化成蓝色,加入终止液后变为黄色,在450nm波长下测定吸光度(OD值)。

注意事项:
显色液A和B需避光保存,现配现用。
使用前需平衡至室温,避免温度影响反应效率。
显色时间需严格控制,过长可能导致背景升高,过短则信号不足。
显色反应需避光进行,防止光解影响结果。
终止液含强酸,操作时需注意安全防护。
ELISA显色操作避坑清单:
ELISA显色操作避坑清单如下:
显色液A/B液:现配现用,避光保存,使用前平衡至室温,避免污染或失效。
显色时间:严格控制时间(通常15-30分钟),避免过长导致背景升高或过短导致信号不足。
显色环境:避光操作,防止底物见光分解,影响显色效果。
显色后处理:加入终止液后立即测定,避免显色过度或反应不全。
显色异常处理:若出现显色不均或异常,检查显色液是否混匀、是否过期,以及孵育条件是否恒定。
注:以上仅供参考!希望以上信息能帮助您做出合适的选择!
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