大鼠组蛋白H2b(H2b)ELISA检测试剂盒 爱赛因生物技术(广州)有限公司专注于生物医药、临床诊断、IVD检测、微流控芯片等领域。

大鼠组蛋白H2b(H2b)ELISA检测试剂盒

检测原理 :

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ ELISA）。在预包被 大鼠组蛋白H2B(H2B)止抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入 大鼠组蛋白H2B(H2B) 校准品和待测样本，再加入另一株 HRP标记的抗 大鼠组蛋白H2B(H2B) （酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体 -抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A和 B，底物在 HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪  450nm波长上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中 大鼠组蛋白H2B(H2B)的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中 大鼠(H2B)的浓度。

所需器材和试剂

1、 酶标仪 (波长 450nm 滤光片)

2、37°C  恒温箱(不推荐使用细胞用 CO2 培养箱)

3、 自动洗板机或多道移液器 /5ml 滴管(手工洗板用)

4、 无菌的 EP 管及一次性吸头

5、 精密的单道 (0.5-10μL, 5-50μL, 20-200μL,  200-1000μL)和多通道移液器(移液器使用前需校准)。

6、吸水纸及加样槽

7、去离子水或蒸馏水

试剂盒组成：

标本收集 :

1、收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒s试管。

2、 血浆抗凝剂推荐使用 EDTA 。避免使用溶血，高血脂标本。

3、标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。

4、 标本收集后若不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于 -20 ℃ , -70 ℃电冰箱内，避免反复冻融，3-6月内检测。

5、 如果您的样本中检测物浓度高于标准品值，请根据实际情况， 做适当倍数稀释 (建议做预实验，以确定稀释倍数)。

储存条件：

大鼠组蛋白H2b(H2b)ELISA检测试剂盒

样品采集及保存：

1、 血清全血样本室温放置 2小时或 2-8°C 过夜。1000×g 离心20分钟，取上清。可立即检测，或按一次使用量分装冻存于-20°C  或-80°C。

2、 血浆抗凝剂推荐使用 EDTA-Na2/K2，样品采集后30分钟内于2-8°C，1000×g 离心15分钟，取上清。可立即检测，或按一次使用量分装冻存于-20°C  或-80°C。其他抗凝剂的使用及选择请查看样品制备指南。

3、组织样本组织样本一般制成组织匀浆.

4、 细胞培养上清收集上清液， 2-8°C，2500rpm 离心 5min，收集澄清的细胞培养上清。立即用于检测，或按一次使用量分装于-80°C  冻存备用。

5、细胞裂解液

注意：注意事项同组织样本。

6、 其他生物样本 2-8°C，1000×g 离心样品 20 分钟。收集上清液立即用于检测，或按 一次使用量分装于-80°C  冻存备用。

操作步骤：

步骤 1： 向孔中加入 100ul 标准品或待测样品，贴上覆膜， 37°C 静置孵育 90 分钟。

洗板： 洗板 2 次。不浸泡。

步骤 2： 加入 100ul 生物s-抗体工作液，贴上覆膜， 37°C 静置孵育 60 分钟。

洗板： 洗板 3 次。每次浸泡 1 分钟。

步骤 3： 加入 100ul HRP-链霉亲和素(SABC)工作液，贴上覆膜，37°C 静置孵育 30 分钟。

洗板： 洗板 5 次。每次浸泡 1 分钟。

步骤 4： 添加 90ul TMB 显色底物。贴上覆膜， 37°C 静置孵育 10-20 分钟(请使用 TMB  显色精准控制方法)。

步骤 5： 添加 50ul 反应终止液。立即在 450nm 处读取 OD450 值并计算。

注：以上仅供参考!希望以上信息能帮助您做出合适的选择!

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