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更新时间:2026-01-22
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贴PCR封板膜其实不难,掌握几个关键点就能又快又好。核心三步:保持无菌环境、精准贴膜、充分压膜,一定要检查密封性。下面爱赛因技术教您具体操作:
一、操作前准备
环境与器材:确保操作台面清洁,提前紫外消毒30分钟。移液器吸头、封板膜等耗材需高压灭菌或为无酶无热源级别。
个人防护:务必佩戴无粉手套,避免指纹污染膜的粘合面或影响光学检测。
选择合适封板膜:根据孔板类型(如96孔、384孔)选择匹配尺寸的封板膜,并确认其透光度(通常>90%)和耐热性(如-40~120℃)适合实验需求。
二、贴膜操作步骤
一步:取膜与揭衬
从自封袋中取出单张封板膜,立即重新封好自封袋,保持剩余膜的无酶环境。
保持封板膜的底衬面朝上,沿预切的切线处缓慢撕下底衬,露出粘性面。
单端标签膜:可先将一端的衬纸部分揭去,将膜初步固定在板上,然后再逐渐揭去其余衬纸,以消除卷曲。
双端标签膜:从中心部位开始,以连续平滑的方式剥离中心衬纸,注意不要触碰到膜的粘合面。

第二步:贴膜与对齐
将粘性面的一端与PCR板的一边对齐,固定好角度后,再缓慢拉向另一端,避免贴歪或产生气泡。
关键技巧:贴膜时,一端贴,另一端轻轻拉住,保持张力和角度,确保膜平整无褶皱。
第三步:压膜与密封
使用压膜板或边缘光滑的卡片(如银行卡、公交卡),沿板的表面缓慢刮压,确保封板膜贴合。
压膜方向:至少水平方向刮压2次(左右方向),垂直方向刮压2次(上下方向)。
重点区域:重点加强孔间区域及板边缘的密封压力,确保无气泡残留。
施力要点:施力需"坚定但不过度",既要保证密封效果,又要避免压坏PCR板或导致孔内液体溢出。
压合完成后,沿切线撕下封板膜的接头部分。
三、质量检查与后续处理
密封性检查:
目视检查每个孔的周边,确认封板膜与孔壁无间隙,有清晰的贴合痕迹。
检查整个板的表面,确保无遗漏的未密封区域。
观察封板膜表面,需保持平整无褶皱,且膜上无残留的液体(若有液体,可能是密封时用力不当导致孔内液体挤出)。
增强粘合力:将密封好的PCR板静置至少10分钟,待封板膜的粘合力增强后再进行实验。
离心处理:有条件的话,可以使用孔板专用离心机进行短暂离心(如2000×g/10秒),进一步确保封板膜与PCR板紧密贴合。
四、注意事项
环境温度:操作环境温度建议在20-30℃,避免低温导致膜材变硬,影响贴合效果。
避免膜向上延伸:对于边缘凸起的平板,要避免封板膜在板上定位不正确,导致膜向上延伸到板的侧壁上。
异常处理:如果观察到褶皱,说明板未正确密封,需要重新贴膜。对于高温实验(>95℃),建议选用硅胶胶粘剂专用膜。

注:以上仅供参考,不作为实验依据,具体请联系品牌或技术老师!
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