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如何选择适合实时荧光定量PCR的96孔板及封板膜?

更新时间:2026-01-13点击次数:25

    如何选择适合实时荧光定量PCR的96孔板及封板膜?

    一、96孔板选择指南

    1.‌颜色:

    白色板‌:反射率>90%,信噪比高,适合低丰度检测(如单细胞测序)。推荐用于顶读式仪器(如ABIQuantStudio、RocheLightCycler®480)。

    透明板‌:透光率>80%,适配底读式仪器(如Bio-RadCFX、宏石SLAN-96S)。需注意信号逸散风险。

    磨砂板‌:性能介于两者之间,是白色板的备选。

    2.‌裙边:

    无裙边‌:易剪裁,适配大多数仪器,但移液稳定性差,需配合板托。

    半裙边‌:移液稳定,部分自动化兼容,适合ABI等仪器。

    全裙边‌:机械强度高,适合自动化工作站操作。

    3.‌容积:

    0.2mL‌:通用性强,适配绝大多数PCR仪、qPCR仪和测序仪。

    0.1mL‌:减少死空间,提升热传导效率,适合高通量实验。

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    二、封板膜操作指南

    1.‌封膜前的准备‌

    选择封板膜‌:荧光定量PCR需使用高透光性封板膜(如透明自粘膜或光学热封膜),确保荧光信号无衰减。

    清洁与防护‌:戴手套操作,避免指纹污染膜面或孔板边缘。

    2.‌封膜操作步骤‌

    贴膜‌:从自封袋中取出单张封板膜,保持底衬面朝上,沿切线撕下底衬。将粘性面一端对齐板子边缘,缓慢贴合并拉平,避免褶皱或偏移。

    压膜‌:手动压膜:用边缘光滑的卡片(如银行卡)水平、垂直各压两次,确保孔间及边缘密封。仪器压膜:使用热封仪(100-110℃)或冷封仪(恒定压力)快速密封,避免气泡或漏液。

    3.‌检查密封性‌

    荧光信号异常‌:原因:膜透光性差或封膜后未离心。解决:使用光学级膜并严格离心。

    三、仪器适配对照表

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    注:以上仅供参考,不作为实验依据,具体请联系品牌或技术老师!

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