PCR实验：封板膜使用指南及问题解决

　　标签：爱赛因封板膜 压敏膜 热封膜 透明封板膜

　　一、封板膜的正确操作步骤

　　贴膜‌

　　取出封板膜后立即重新密封自封袋，保持无酶环境‌。

　　撕掉底衬，将粘性面一端对齐PCR板边缘，缓慢拉平至另一端，避免偏移或产生气泡‌。

　　若为单端标签膜，先锚固一端再逐步撕衬纸;双端标签膜需平滑剥离中心衬纸。

　　压膜‌

　　使用压膜板或光滑卡片(如银行卡)，沿水平和垂直方向各刮压2次，确保边缘和孔间缝隙全密封‌。

　　施力需坚定但不过度，避免压坏板或导致液体溢出‌。

　　检查‌

　　目视检查每个孔周边是否无间隙，封板膜表面无褶皱或液体残留‌。

　　密封后静置10分钟，使粘合剂充分固化‌。

　　二、关键注意事项

　　防污染‌：全程戴无粉手套，避免接触粘性面或孔口‌。

　　适配性‌：qPCR需选择高透光率(≥86%)、耐温-20℃~120℃的封板膜，避免信号干扰‌。

　　密封性‌：96孔板可能存在公差变形，需多次刮压确保无漏液‌。

　　材质选择‌：普通PCR膜透光性较差，qPCR专用膜需为四切角设计‌。

　　三、常见问题解决方案

　　信号弱‌：检查封板膜是否与qPCR仪光路匹配(如白色耗材增强反射)‌。

　　蒸发率高‌：优先选择压敏型封板膜，蒸发率需≤3%(尤其小体系样本)‌。

　　封膜不牢‌：重新刮压边缘或更换高粘性封板膜‌。

　　污染处理‌：若发现污染，立即更换封板膜并清洁板面。

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